1 Introducción
La descolonización del Sáhara por parte de España en los años 70 del siglo XX, que terminó en una apropiación del territorio por parte de Marruecos, obligó a cientos de miles de Saharauis a huir a la vecina Argelia como refugiados. Con ellos se llevaron sus animales domésticos, como principal patrimonio de un pueblo de tradición nómada y pastoril como el Saharaui.
Hoy, los campamentos de refugiados Saharauis se ubican en una meseta desértica llamada Hammada, teniendo como referencia más cercana la ciudad de Tindouf, al Suroeste de Argelia, en el territorio más árido e inhóspito del desierto del Sáhara (Figuras 1a, 1b). En estos campamentos viven cerca de 200.000 personas desde el año 1976.
a. Localización geográfica de los campamentos saharauis próximos a Tindouf (Argelia). b. Fotografía de uno de los campamentos saharauis (http://www.sadicum.org/campamentos/campamentos.htm).
Estos campamentos han tomado los nombres de provincias y ciudades de su tierra de origen: el Sáhara Occidental. Los campamentos de El Aaiun, Ausserd y Smara están situados más cerca de la ciudad argelina de Tindouf, mientras que el campamento de Dajla se ubica más alejado que los anteriores (Figura 1b). Están distribuidos de forma discontinua en el territorio, dependiendo de la existencia de pozos de agua potable en el lugar. La Hammada de Tindouf se caracteriza por la rigidez de su clima, con temperaturas muy oscilantes entre el día y la noche, que pueden superar los 50°–60°C en verano y hasta –1°C en invierno.
Otro factor adverso que dificulta la supervivencia en esta zona son los vientos sirocos y las tormentas de arena, muy violentas y secas. Debido a la escasez de agua y de vegetación, estos territorios no habían sido objeto de explotaciones agrícolas hasta el asentamiento en esta región del pueblo Saharaui.
Saharauis (‘gente del desierto’), es el nombre dado a las tribus nómadas y de pastoreo que tradicionalmente habitaban en el área costera occidental de África, llamada Sáhara. La población Saharaui era esencialmente nómada, pastores de camellos, cabras y ovejas en las llanuras bajas arenosas del Sáhara Occidental, dependientes de alimentos como la leche de camella, carne, dátiles, azúcar y pequeñas cantidades de cereales y legumbres. Se movilizaban dependiendo de la estacionalidad y sus rutas se basaban fundamentalmente en la localización de los pozos, abrevaderos y las lluvias. En 1960, bajo la colonización española, los Saharauis se hicieron más sedentarios.
La economía saharaui tradicional se ha basado en el pastoreo de razas locales fuertemente adaptadas a un medio tan hostil como es el desierto, aunque siempre planteándose como una economía de subsistencia, a través de pastores nómadas que han utilizaban como principal medio de desplazamiento el camello, llevando consigo sus rebaños de cabras y ovejas. La agricultura, poco extendida, se limitaba tradicionalmente al cultivo de productos como la cebada, generalmente en terrenos arcillosos de subsuelo húmedo. La pesca, por otro lado, ha constituido siempre uno de los grandes recursos para el país, desarrollándose una importante actividad pesquera en sus costas. En la actualidad, la única práctica de agricultura en los campamentos Saharahuis, dentro de su sistema de subsistencia autárquico, es el cultivo de cereales, especialmente la cebada, en los periodos y regiones en que las lluvias permiten la siembra.
Los recursos genéticos de pequeños rumiantes en el África subsahariana juegan un papel importante en el bienestar de las personas, especialmente en zonas con mayor escasez de recursos. Estos recursos genéticos, incluyendo ovejas y cabras, proporcionan sustento, ingresos en efectivo, vínculos socio-culturales y constituyen un seguro contra riesgos en ambientes frágiles y desfavorables, sobre todo en las zonas rurales (Fitzhugh et al., Reference Fitzhugh, Ehui and Lahlou-Kassi1992; Lebbie et al., Reference Lebbie, Yapi-Gnaore, Rege and Baker1996; Ramsay et al., Reference Ramsay, Smith and Geldenhuys1984; Winrock International, 1992).
Atendiendo a la situación actual de los Saharauis como pueblo en éxodo, en los que todos los presupuestos y recursos disponibles se destinan a la supervivencia, hasta ahora se han realizado muy pocos estudios científicos sobre sus recursos genéticos animales, y por tanto, no han existido programas de conservación ni tan siquiera de caracterización de sus razas nacionales. Sólo debemos destacar aquí el trabajo de Schulz et al. (Reference Schulz, Tupac-Yupanqui, Martínez, Méndez, Delgado, Gómez, Dunner and Cañón2010) sobre la caracterización genética del camello Saharaui o raza del Sahel.
En el seno de una colaboración entre técnicos españoles y saharauis se ha planteado en el presente trabajo una caracterización genética con marcadores microsatélites de las razas ovinas y caprinas que constituyen buena parte del patrimonio genético y del sustento del pueblo Saharaui refugiado en los campamentos de Tindouf.
1.2 Patrimonio genético saharaui
1.2.1 Las ovejas saharauis
La oveja Kerrian es muy resistente. Por su aspecto externo podría pensarse que pertenece al tronco merino y procede de la época de la presencia española en el Sáhara Occidental. Son animales no muy grandes, sus hembras son buenas productoras de leche y carne y su lana se utiliza para la confección de las viviendas de los campamentos Saharauis. Los cueros son más frágiles que los de los caprinos. Los de ovino se utilizan para confeccionar sandalias, almohadas y bolsas para el tabaco. Son de vellón blanco y a veces con manchas negras. Los machos tienen cuernos (Figura 2, derecha). La oveja Sidaun proviene de Mali, de Argelia y de Mauritania. Hay de capas blancas, blancas y negras y de color almendra. La raza Adiman, es más parecida a la Sidaun, pero es más robusta y tiene más pelaje, de mayor alzada que la Kerrian aunque tiene menos pelo y es menos resistente.
Grabado de las cabras (izquierda) y ovejas saharauis (derecha), realizado por D. Ángel Domínguez
1.2.2 La cabra Buzguender
La cabra autóctona del Sáhara es la Buzguender, y se encuentra también en la frontera con Mauritania. Son negras, con mucho pelo, bajas de alzada, unos 80 cm, suelen tener perilla y algunas presentan mamellas (Figura 2, izquierda). Las orejas son medianas a grandes y caídas. En cuanto a los cuernos, los machos tienen cuernos en tirabuzón y las hembras en medio arco. Viven una media de 9 a 10 años. Se caracterizan por su gran resistencia a períodos sin agua, también al frío y a las enfermedades. Si ha habido buenos pastos paren un cabrito al inicio del invierno. Además de la carne y la leche, se utiliza el pelo, que se trenza y con el que se confeccionan las viviendas típicas de los campamentos saharauis. Las pieles se emplean para fabricar depósitos de agua y leche y para confeccionar sandalias. Otras razas caprinas africanas e incluso españolas tienen cada vez mayor implantación en el Sáhara y se están cruzando con las autóctonas, colocando a estas últimas en un mayor riesgo de desaparición.
2 Material y métodos
Este estudio es el resultado de una colaboración entre técnicos españoles y saharauis cuyo objetivo principal es la sensibilización de la situación actual de las razas autóctonas de ovinos y caprinos saharauis. Cuando los saharauis fueron desplazados por Marruecos de su territorio, llevaron con ellos sus razas de ovejas y cabras autóctonas, pero durante el tiempo transcurrido en los campamentos de refugiados, estos han ido desapareciendo debido en gran medida a una estrategia para disolver el patrimonio cultural saharaui, del que forman parte sus razas autóctonas, que consiste en el cruzamiento de las mismas con razas locales de Marruecos. Los pocos rebaños de ovejas que quedan, pertenecen a la República Árabe Saharaui Democrática, pero un pequeño número de animales está todavía en manos privadas que ante la imposibilidad de criar sus razas tradicionales, compran para la fiesta del cordero animales de otras razas de Mauritania o Mali. Esto dificulta en gran medida encontrar animales puros, sobre todo de ovinos. En el caso de los caprinos, los pocos animales puros que quedan están en manos de mujeres viudas de guerra que mantienen su raza tradicional.
Todas estas circunstancias han dificultado el disponer de un muestreo representativo de las razas locales saharauis en los campamentos de refugiados, y, aunque el número de muestras es escaso para un estudio de caracterización genética, este trabajo contribuirá al conocimiento de estas razas y servirá para despertar el interés por ellas antes de su desaparición total.
Se han analizado 21 muestras de pelo de la raza ovina Sidaun, 5 de la raza ovina Kerrian y 11 de la raza caprina Buzguender obtenidas en varios rebaños de los campamentos Saharauis de Tindouf (Argelia).
Se ha extraído el ADN de los bulbos pilosos de las muestras utilizando el método de Kawasaki (Reference Kawasaki1990), y se han amplificado 31 microsatélites en las muestras de ovinos (Tabla 1) y 29 en la raza caprina Buzguender (Tabla 4) mediante la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa. Los microsatélites utilizados en ambas especies se han seleccionado siguiendo las recomendaciones de la FAO (Hoffman et al., Reference Hoffmann, Marsan, Barker, Cothran, Hanotte, Lenstra, Milan, Weigend and Simianer2004) y han demostrado su utilidad en estudios de diversidad ovina y caprina en trabajos previos (Quiroz et al., Reference Quiroz, Martínez, Zaragoza, Perezgrovas, Vega-Pla and Delgado2008; Lasagna et al., Reference Lasagna, Bianchi, Ceccobelli, Landi, Martínez, Vega-Pla, Panella, Delgado and Sarti2011; Martínez et al., Reference Martínez, Acosta, Vega-Pla and Delgado2006). La separación por tamaños de los fragmentos obtenidos se ha realizado mediante electroforesis en gel de poliacrilamida en un secuenciador automático ABI 377XL. Para el análisis de los fragmentos y la tipificación alélica se han utilizado los programas informáticos Genescan Analysis 3.1.2 y Genotyper 2.5.2 respectivamente. Se han calculado las frecuencias alélicas, las heterocigosis y el contenido de información polimórfica (PIC) de cada microsatélite mediante la aplicación Microsatellite Toolkit (Park, Reference Park2002). El número efectivo de alelos se ha calculado mediante el programa Fstat v. 2.9.3 (Goudet, Reference Goudet2001). Se ha realizado una prueba de equilibrio Hardy-Weinberg mediante el programa Genepop v. 3.1c (Raymond & Rousset, Reference Raymond and Rousset1995), que aplica el test exacto de Fisher usando el método en cadena de Monte Carlo Markov (Guo & Thompson, Reference Guo and Thompson1992). Se ha calculado el valor de Fis (Weir & Cockerham, Reference Weir and Cockerham1984) de cada población con un intervalo de confianza de 95% con 1000 permutaciones y 10 000 bootstraps mediante el programa Genetix v. 4.02 (Belkhir et al., Reference Belkhir, Borsa, Chikhi, Raufaste and Bonhomme2003).
Microsatélites tipificados, número de alelos detectados, número efectivo de alelos, heterocigosis esperada y observada, contenido de información polimórfica, y P-value en la raza ovina Sidaun.
Nº Alelos: Número de alelos. Ne: Número efectivo de alelos. He: Heterocigosis esperada. Ho: Heterocigosis observada. PIC: Contenido de información polimórfica. P-value: Valores de probabilidad obtenidos en la prueba de equilibrio Hardy-Weinberg realizada mediante un test exacto aplicando el método de Monte Carlo con 100 baterías de análisis y 5000 permutaciones por batería (se destacan en negrita los marcadores que no se encuentran en equilibrio Hardy-Weinberg, p < 0,05).
3 Resultados y Discusión
3.1 Caracterización genética de las razas ovinas razas Kerrian y Sidaun
En la raza Sidaun, todos los microsatélites utilizados han resultado polimórficos, encontrándose un mínimo de 2 alelos en el microsatélite ETH10 y un máximo de 11 alelos para el marcador HSC (Tabla 1). El número efectivo de alelos mínimo se encuentra también en el marcador ETH10 (1,27) y el máximo en el marcador HSC (7,67). La heterocigosis esperada más alta se encuentra para el marcador HSC con un valor de 0,891 y la más baja para el ETH10 con un valor de 0,215. Los valores de heterocigosis observada oscilan entre un máximo de 0,905 para los marcadores BM1824, CSSM66, OarCP20 y OarCP49 y un mínimo de 0,238 para el locus ETH10. El valor de PIC más alto es el del marcador HSC y el más bajo el del ETH10. Considerando que un valor de PIC superior a 0,50 indica que un marcador es muy informativo, se puede decir que 27 de los marcadores son muy informativos a la hora de detectar variabilidad genética en la raza ovina Sidaun. Destaca el marcador ETH10 por ser poco informativo y los tres marcadores restantes son medianamente informativos en esta población (valor de PIC entre 0,25 y 0,50). Los valores de probabilidad obtenidos en la prueba de equilibrio Hardy-Weinberg para todas las combinaciones locus/población muestran que once marcadores se desvían significativamente del equilibrio Hardy-Weinberg.
En cuanto a la raza ovina Kerrian, todos los microsatélites utilizados, excepto el ETH10, han resultado polimórficos encontrándose un mínimo de 2 alelos (BM1818 y OarAE0129) y un máximo de 6 (Tabla 2). El número efectivo de alelos oscila entre un mínimo de 1,85 y un máximo de 5,0. La heterocigosis esperada varía entre 0,511 y 0,889 y la observada entre 0,250 y 1,000. Veinticuatro de los marcadores han resultado muy informativos y tres microsatélites se desvían significativamente del equilibrio Hardy-Weinberg.
Microsatélites tipificados, número de alelos detectados, número efectivo de alelos, heterocigosis esperada y observada, contenido de información polimórfica, y P-value en la raza ovina Kerrian.
Nº Alelos: Número de alelos. Ne: Número efectivo de alelos. He: Heterocigosis esperada. Ho: Heterocigosis por recuento directo. PIC: Contenido de información polimórfica. P-value: Valores de probabilidad obtenidos en la prueba de equilibrio Hardy-Weinberg realizada mediante un test exacto aplicando el método de Monte Carlo con 100 baterías de análisis y 5000 permutaciones por batería (se destacan en negrita los marcadores que no se encuentran en equilibrio Hardy-Weinberg, p < 0,05).
Los resultados de la raza Kerrian deben ser interpretados con cautela debido al escaso número de muestras analizadas de esta población. El promedio de alelos de la raza Sidaun y las heterocigosis medias en las dos razas ovinas (Tabla 3) son similares a los encontrados en otras poblaciones ovinas (Ceccobelli et al., Reference Ceccobelli, Lasagna, Landi, Martínez and Sarti2009; Glowatzki-Mullis et al., Reference Glowatzki-Mullis, Muntwyler, Baumle and Gaillard2009; Vega-Pla et al., Reference Martínez, Quiroz, Delgado and Vega-Pla2007; Quiroz et al., Reference Quiroz, Martínez, Zaragoza, Perezgrovas, Vega-Pla and Delgado2008; Santos-Silva et al., Reference Santos-Silva, Ivo, Sousa, Carolino, Ginja and Gama2008). Tanto el promedio de alelos como los valores de heterocigosis indican que la raza Sidaun muestra una diversidad genética elevada. El valor de Fis no es significativamente diferente de cero en ninguna de las dos razas.
Número de muestras analizadas, número promedio de alelos, número efectivo de alelos medio, heterocigosis media esperada y observada para todos los microsatélites, y valores de Fis por población.
N: Número de muestras analizadas. NA: Número promedio de alelos. Ne: Número efectivo de alelos medio. He: Heterocigosis media esperada. Ho: Heterocigosis media observada. SD: Desviación estándar; IC: Intervalo de confianza con 10 000 bootstraps.
Con estos primeros resultados se conoce la situación genética de las razas y en base a ella, sería posible diseñar estrategias oportunas de conservación de estas poblaciones ovinas.
3.2 Caracterización genética de la raza caprina Buzguender
Sólo se han analizado once animales de la raza caprina Buzguender en el análisis de su diversidad genética, por lo que los resultados obtenidos deben ser interpretados con prudencia por no cumplir la muestra todos los requisitos de representatividad de la población. Todos los microsatélites utilizados han resultado polimórficos encontrándose un mínimo de 2 alelos (ETH225 y SPS115) y un máximo de 8 (Tabla 4). El número efectivo de alelos oscila entre un mínimo de 1,20 y un máximo de 6,54. La heterocigosis esperada varía entre 0,173 y 0,887 y la observada entre 0,182 y 0,909. 25 de los marcadores han resultado muy informativos (PIC superior a 0,5) y cuatro microsatélites se desvían significativamente del equilibrio Hardy-Weinberg (p < 0,05).
Microsatélites tipificados, número de alelos detectados, número efectivo de alelos, heterocigosis esperada y observada, contenido de información polimórfica, y P-value en la raza caprina Buzguender.
Nº Alelos: Número de alelos. Ne: Número efectivo de alelos. He: Heterocigosis esperada. Ho: Heterocigosis por recuento directo. PIC: Contenido de información polimórfica. P-value: Valores de probabilidad obtenidos en la prueba de equilibrio Hardy-Weinberg realizada mediante un test exacto aplicando el método de Monte Carlo con 100 baterías de análisis y 5000 permutaciones por batería (se destacan en negrita los marcadores que no se encuentran en equilibrio Hardy-Weinberg, p < 0,05).
El promedio de alelos y las heterocigosis medias en la cabra Buzguender (Tabla 5) son similares a los encontrados en otras poblaciones caprinas (Bruno-de-Sousa et al., Reference Bruno-de-Sousa, Martínez, Ginja, Santos-Silva, Carolino, Delgado and Gama2011; Cañón et al., Reference Cañón, García, García-Atance, Obexer-Ruff, Lenstra, Ajmone-Marsan and Dunner2006; Martínez et al., Reference Martínez, Acosta, Vega-Pla and Delgado2006; Martínez et al., Reference Martínez, Carrera, Acosta, Rodríguez-Gallardo, Cabello, Camacho and Delgado2004; Martínez et al., Reference Martínez, Landi, Amills, Capote, Gómez, Jordana, Ferrando, Manunza, Martín, Pons, Vidal and Delgado2011). Tanto el promedio de alelos como los valores de heterocigosis indican que la raza Buzguender muestra una diversidad genética elevada. El valor de Fis no es significativamente diferente de cero.
Número de muestras analizadas, número promedio de alelos, número efectivo de alelos medio, heterocigosis media esperada y observada para todos los microsatélites, y valores de Fis por población.
N: Número de muestras analizadas. NA: Número promedio de alelos. Ne: Número efectivo de alelos medio. He: Heterocigosis media esperada. Ho: Heterocigosis media observada. SD: Desviación estándar; IC: Intervalo de confianza con 10 000 bootstraps.
Al igual que se ha comentado en el estudio sobre los ovinos, esta parte del trabajo es el primer paso para cualquier estrategia que se quiera abordar con respecto a la gestión de la raza caprina Buzguender. Se ha realizado la caracterización genética de la misma, aunque sería conveniente aumentar el tamaño de la muestra para que los resultados fueran más sólidos. Con estos primeros resultados se conoce la situación genética de la raza y en base a ella, sería posible diseñar estrategias oportunas de conservación de esta población caprina, la cual sigue manteniendo signos de diferenciación genética y aun se mantiene fuera de influencias exóticas relevantes.
4 Conclusiones
Las razas ovinas saharauis Sidaun y Kerrian y la caprina Buzguender muestran una diversidad genética similar a la encontrada en otras razas españolas, portuguesas y africanas, que permitiría la implementación de un programa de conservación genética de estos recursos zoogenéticos tan importantes para una población tan desfavorecida como es el pueblo saharaui.
Agradecimientos
Los autores desean mostrar su agradecimiento a Baba Edfeid, Secretario General del Ministerio de Desarrollo Económico SGMºDE, así como a Iñaki Gaztañaga y a Elena Unzueta, por el apoyo prestado para que este trabajo fuera posible.
